@MASTERSTHESIS{ 2020:1188022747,
 	title = {Caracterização da expressão de genes de peptídeos antimicrobianos (PAM’s) da lagarta Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae) em resposta ao desafio microbiano},
 	year = {2020},
 	url = "http://tede.unioeste.br/handle/tede/5705",
 	abstract = "Os insetos representam a classe mais numerosa dos organismos vivos. Expostos a
 infecções, apresentam múltiplas reações de defesa inatas. Possuem uma grande
 variedade de espécies, sendo adaptados a diversos habitats e, em razão disso, é de
 grande importância científica o estudo do seu sistema imune frente a agressões,
 sejam elas ambientais ou biológicas, através de microrganismos patogênicos. A
 lagarta Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae), inseto modelo e objeto
 deste estudo, é considerada uma praga para a lavoura de milho, arroz, algodão,
 entre outras, e tem um sistema imune que é capaz de protegê-la de diversos
 desafios. A imunidade humoral inata na classe Insecta inclui a expressão de
 Peptídeos Antimicrobianos (PAM’s) produzidos no órgão análogo ao fígado dos
 vertebrados, denominado de corpo gorduroso. Os PAM’s produzidos são secretados
 na hemolinfa, podendo esta produção ser induzida, aumentando a expressão a
 agentes patogênicos. Os PAM’s atuam basicamente desintegrando a parede celular
 bacteriana, causando lise e morte celular. Isso os torna fortes candidatos a serem
 utilizados como novos antimicrobianos frente a infecções principalmente
 bacterianas, visto que atualmente há uma ampla gama de microrganismos
 multirresistentes. Este estudo teve como objetivo caracterizar a expressão da
 Atacina e Gloverina, ambos PAM’s já descritos em outras espécies de Lepidópteros,
 após desafio das lagartas com microrganismo, entretanto ainda não reportados em
 S. frugiperda. A detecção dos peptídeos na fase larval da S. frugiperda foi realizada
 por Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) com primers desenhados a partir de
 sequências homólogas destes peptídeos presentes na ordem Lepidoptera. Os
 experimentos foram conduzidos por meio de extração de RNA total do corpo
 gorduroso, síntese de cDNA e RT-PCR convencional, após o desafio das lagartas
 com microrganismos. Os resultados mostraram que o desafio das lagartas com os
 microrganismos (Escherechia coli, Bacilus subitlis e Beuaveria bassiana)
 provocaram aumento da expressão dos genes PAM’s por RT-PCR. Em adição, a
 expressão do gene foi observada na hemolinfa das lagartas através da extração das
 proteínas e visualização em Tricina SDS-PAGE, onde se constatou a presença dos
 PAM’s induzidos com massa molecular inferior a 6,5 kDa. As bandas de peptídeos
 com massas moleculares de 6,1 kDa e 4,7 kDa, respectivamente, foram retiradas e
 tripsinizadas a partir do gel 1-D e submetidas à Espectrometria de massas (MaldiTof), entretanto não foi obtida identificação positiva com os dados de espectrometria
 de massas tipo Maldi-Tof. Contudo a indução das bandas peptídicas com o desafio
 microbiano sugere que estas são prováveis peptídeos da classe dos PAM’s com
 função imune em S. frugiperda.",
 	publisher = {Universidade Estadual do Oeste do Paraná},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas},
 	note = {Centro de Ciências Médicas e Farmacêuticas}
}