@MASTERSTHESIS{ 2015:1741647902, title = {Purificação e caracterização bioquímica de xilanase-I produzida por Penicillium crustosum e sua aplicação.}, year = {2015}, url = "http://tede.unioeste.br:8080/tede/handle/tede/621", abstract = "O!complexo! xilanolítico!é! formado!por!um!grupo!de!enzimas!capazes!de!atuar!em! vários! sítios! da! cadeia! do! xilano,! uma! hemicelulose! encontrada! na! parede! celular! das!plantas,!e!degradáIlo!em!xilooligossacarídeos,! xilotrioses,! xilobioses!e! xiloses.!! As!endoI1,4IβIxilanases!(1,4IβIDIxilano!xilanohidrolasen!EC!3.2.1.8)!que!hidrolisam! a! cadeia! principal! do! xilano! de! modo! aleatório,! produzindo! uma! mistura! de! xilooligossacarídeosn! βIxilosidases! (E.C.! 3.2.1.37),! que! hidrolisam! apenas! cadeias! curtas! de! xilano,! liberando! xilosen! acetil! xilano! esterases! (E.C.! 3.1.1.72)! que! hidrolisam! grupos! acetato! da! cadeia! principal! e! a! αILIarabinofuranosidases! (E.C.! 3.2.1.55),!que!hidrolisam!arabinofuranose!das!cadeias!laterais.!Nas!últimas!décadas,! o! interesse! por! xilanases! microbianas! tem! aumentado! devido! o! seu! potencial! de! aplicação! biotecnológica,! elas! têm! sido! utilizadas! em! vários! setores! industriais,! incluindo:! na! suplementação! da! ração! de! animais! monogástricos,! no! préI branqueamento! da! polpa! de! papel! e! celulose,! na! sacarificação! de! biomassa! lignocelulósica,!na!indústria!têxtil,!na!panificação!e!na!clarificação!de!sucos!e!vinhos.! Neste! contexto,! este! estudo! teve! como! objetivo! purificar! e! caracterizar! bioquimicamente! a! xilanaseII# do! fungo! Penicillium# crustosum! utilizando! palha! de! milho! como! fonte! indutora! em! cultivo! líquido,! bem! como! sua! aplicação! biotecnológica.!A!xilanaseII!do!fungo!P.#crustosum!foi!purificada!a!partir!do!extrato! bruto! obtido! de! cultivo! líquido! estacionário! suplementado! com! palha! de! milho! 2%.! Após! três! colunas! cromatográficas! (DEAE,! CMISephadex! e! coluna! de! filtração! Sephadex! GI75)! a! enzima! exibiu! homogeneidade! e! apresentou! massa! molecular! com! uma! única! banda! de! 23,44! kDa.! A! xilanaseII! exibiu! pH! ótimo! de! 5,0! e! estabilidade!na!faixa!de!pH!entre!4,0I7,0.!A!temperatura!ótima!da!xilanase!foi!50!°C,! com!meia!vida!de!62!minutos!a!50!°C,!porém!a!40!°C!e!45!ºC!a!enzima!exibiu!meia! vida!(T½)!de!120!minutos!e!74!minutos,!respectivamente.!!Os!parâmetros!cinéticos! para! o! substrato! xilano! de! Beechwood! foram! Km! de! 1,56! mg/mL! e! Vmáx! 1.000! μmol/min/mL.!Os! compostos!EDTA! e!Mn2+! aumentaram! a! atividade! xilanásica! em! 47%!e!75%,!respectivamente,!enquanto!que!o!Na+!e!Ca2+!inibiram!a!ação!enzimática! em!18%!e!22%!na!concentração!de!5!mM.!O!extrato!bruto!e!a!xilanaseII!purificada! não!apresentou!efeito! citotóxico,!consequentemente!estes!podem!ser!aplicados!na! indústria!alimentícia.!A!xilanaseII!foi!eficaz!na!clarificação!dos!sucos!de!goiaba,!pêra! e!manga! resultando!em!turbidez!de! 91,! 87! e!89%! respectivamente!em!relação!ao! controle.!Assim,!a! xilanaseII! de!P.# crustosum!exibiu!propriedades! interessantes!de! aplicaçã", publisher = {Universidade Estadual do Oeste do Parana}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas Mestrado}, note = {Ciências Farmacêuticas} }