@MASTERSTHESIS{ 2019:1577445249, title = {Isolamento, caracterização da lectina das sementes de Eugenia pyriformis e potencial antimicrobiano}, year = {2019}, url = "http://tede.unioeste.br/handle/tede/4673", abstract = "Lectinas são proteínas de origem não imune, que despertam interesse biotecnológico na área da saúde, devido à sua capacidade de ligação seletiva e reversível aos carboidratos, mediando processos de reconhecimento celular. O objetivo deste trabalho foi extrair lectinas, determinar sua especificidade aos carboidratos e avaliar o potencial antibacteriano no extrato e frações precipitadas e dialisadas das sementes de Eugenia pyriformis. A extração aquosa foi realizada em tampão fosfato pH 7,0, 50 mM com NaCl 0,15 M, seguida de fracionamento com sulfato de amônio nas saturações de 040 (FPD 0-40) e 40-80% (FPD 40-80). As dosagens fenólicas e proteicas foram realizadas pelos métodos de Folin-Cicalteau e Bradford, respectivamente. Para a detecção das lectinas, as amostras nativas e termicamente desnaturadas foram submetidas a testes de atividade hemaglutinante (AH) em eritrócitos humanos (ABO), pelo método de diluição seriada. A inibição da AH das lectinas foi ensaiada com a pré-incubação das amostras nativas com os carboidratos D(+)galactose, D(+)glicose, D(+)maltose, D(+)manose, D(+) sacarose, D(+) ribose, D(+) fucose, D(+) arabinose, D(+) glicosamina, D(+) lactose monohidratada, D(+) galactosamina, N-acetil D-glicosamina, D(+) trealose di-hidratada, D(+) ramnose e D-(+)-raffinose penta-hidratada. Os ensaios antibacterianos foram realizados por meio de disco-difusão para as cepas: Staphylococcus aureus, Geobacillus stearothermophilus, Pseudomonas aeruginosa, Shigella flexneri, Escherichia coli, Klebsiella sp., Morganella sp., Serratia sp., Proteus Mirabilis, Enterococcus faecalis, Bacillus cereus, Streptococcus uberis, Streptococcus pyogenes e Streptococcus agalactiae. As dosagens revelaram que as sementes contêm baixo teor de proteínas (1%) e fenóis (0,1%). Os ensaios de AH das amostras nativas resultaram positivos para hemácias ABO, com preferência para o tipo A e maior AH (1024) para a FPD 40-80. Após a desnaturação térmica das amostras, as atividades sofreram considerável diminuição (de 1024 para 16), mostrando que a maior parte da AH é devida à presença de lectinas, que apresentaram afinidade principalmente por D (+) -galactose, D (+) -arabinose, D(+)lactose e D(+)-galactosamina. Os testes antibacterianos das amostras nativas apresentaram formação de halos de inibição para as cepas Staphylococcus aureus, Streptococcus uberis, Enterococcus faecalis, Shigella flexneri, Escherichia coli, Klebsiella sp. e Serratia sp., para todas as frações testadas. A perda da atividade antibacteriana nas amostras desnaturadas mostra a natureza proteica dos compostos responsáveis pelo efeito. A diversidade da especificidade dos carboidratos em cada amostra sugere a presença de no mínimo duas lectinas nas sementes.", publisher = {Universidade Estadual do Oeste do Paraná}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Ciências Aplicadas à Saúde}, note = {Centro de Ciências da Saúde} }