@PHDTHESIS{ 2019:456664849,
 	title = {Construção, caracterização e perfil biotecnológico do gene xynA2 de Caulobacter crescentus},
 	year = {2019},
 	url = "http://tede.unioeste.br/handle/tede/4477",
 	abstract = "Resíduos lignocelulósicos, gerados em práticas agroindustriais, são os mais abundantes da
 natureza e, atualmente, há uma preocupação mundial para aproveitá-los como matériaprima
 na produção de energia, compostos químicos e alimentos, visto que são uma fonte
 abundante de matéria orgânica renovável. A biotecnologia surge com alternativas
 inovadoras, por meio da utilização de enzimas na biodegradabilidade de resíduos
 agroindustriais. Além disso, as enzimas também podem ser aplicadas em bioprocessos
 industriais, visando a uma otimização dos tratamentos convencionais, como no
 biotratamento de denim. Caulobacter crescentus é uma bactéria promissora para a
 exploração biotecnológica, pois apresenta sete genes que codificam enzimas do complexo
 xilanolítico, envolvidas no metabolismo de materiais lignocelulósicos, sendo cinco genes de
 b-xilosidases e dois de endoxilanases. O objetivo deste estudo foi clonar, expressar e
 caracterizar bioquimicamente o gene xynA2, que codifica a xilanase II ou XynA2, além de
 testar sua ação xilanolítica na hidrólise do resíduo palha de milho e no biotratamento do
 denim. O xynA2 foi amplificado por PCR, clonado no vetor de clonagem pUCBM21 e
 subclonado no vetor de expressão pTrcHisA, que produziu uma proteína com cauda de
 histidinas N-terminal. A xilanase recombinante XynA2 foi purificada em resina de níquelsepharose,
 exibindo uma única banda de proteína no gel SDS-PAGE (43 kDa), com
 atividade específica de 1 U.mg-1. A XynA2 foi caracterizada com pH ótimo alcalino (8) e
 temperatura ótima de 60 oC, além de ser considerada termorresistente a 65 oC e estável ao
 pH alcalino. A enzima de C. crescentus apresentou atividade predominante para o substrato
 xilana de beechwood 1 %, mas não tem função celulásica. Essa especificidade ao substrato
 permite à enzima que remova seletivamente os componentes da hemicelulose, tornando os
 processos industriais mais limpos e rentáveis. Dentre os compostos testados frente à
 atividade xilanolítica de XynA2, o DTT foi o que obteve o melhor resultado, pois diminuiu o
 KM da enzima de 21,49 para 5,78 mg.mL-1 e aumentou a Kcat/KM de 0,12 para 1,63 U.s-1,
 melhorando sua catálise. Além disso, essa enzima não é inibida na presença de
 concentrações moderadas de xilose (50 μmol.mL-1), sugerindo que possa atuar em reações
 de hidrólise prolongadas, pois não é reprimida por seu produto final. A XynA2 quebrou
 eficientemente a palha de milho, liberando açúcares redutores e XOS, que apresentam
 potencial para aplicações industriais. XynA2 também foi aplicada ao biotratamento do jeans,
 levando à diminuição de resquícios de hemicelulose do tecido e à melhora de suas
 propriedades estéticas e comerciais. Segundo a literatura, até o momento, poucas enzimas
 xilanolíticas alcalíficas e termofílicas bacterianas foram caracterizadas. Desse modo, este
 trabalho contribuiu fortemente para o estudo das xilanases, que podem atuar em diferentes
 bioprocessos industriais, como os do segmento têxtil e os que utilizam resíduos
 lignocelulósicos como matéria-prima.",
 	publisher = {Universidade Estadual do Oeste do Paraná},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Engenharia Agrícola},
 	note = {Centro de Ciências Exatas e Tecnológicas}
}