@MASTERSTHESIS{ 2017:2146780536,
 	title = {Purificação da xilanase de Thermomyces lanuginosus e suas propriedades estruturais e catalíticas},
 	year = {2017},
 	url = "http://tede.unioeste.br/handle/tede/2962",
 	abstract = "As enzimas do complexo xilanolítico, provenientes de microrganismos, têm se
 tornado uma ferramenta biotecnológica cada vez mais importante, principalmente
 em processos industriais que requerem temperaturas elevadas, como na indústria
 de panificação, de rações animais, têxtil, polpa e celulose. Dentre os fungos
 produtores de enzimas termoestáveis, Thermomyces lanuginosus tem se destacado
 como bom produtor de xilanases. Nesse contexto, a xilanase do fungo termofílico
 recentemente isolado da Mata Atlântica do Paraná, T. lanuginosus, foi purificada,
 caracterizada bioquimicamente, bem como um estudo de correlação estruturaatividade
 da enzima foi investigado através das espectroscopias de dicroísmo
 circular e fluorescência. A xilanase extracelular foi purificada após quatro etapas
 cromatográficas envolvendo colunas de troca iônica e filtração molecular. A pureza e
 massa molecular (21,3 kDa) da enzima foram determinadas por SDS-PAGE e
 MALDI-TOF/MS. A xilanase é altamente específica para o substrato xilano de
 beechwood e gerou principalmente xilobiose (X2) e xilotriose (X3), produtos
 característicos da ação de endoxilanase. A enzima foi capaz de clivar os xilooligossacarídeos
 xitotetraose e xilopentaose, exceto a xilobiose e xilotriose. Exibe
 maior atividade em pH 6,5 e temperatura de 75°C, com estabilidade entre os pH
 5,0-8,0 durante 100 horas e termoestabilidade entre 40 e 75°C durante 5 horas. A
 deconvolução do espectro de dicroísmo circular (CD) da enzima revela uma
 conformação secundária rica em estruturas-β, com temperatura do ponto médio da
 transição (Tm) de 73,0  0,2°C. Neste estudo estrutural, a xilanase revelou que, para
 desempenhar elevada atividade enzimática, foi necessário ocorrer mudança
 conformacional. Sua estrutura secundária é conservada mesmo em extremos de pH,
 em temperaturas até 70°C e na presença de MnCl2 (1 mM), DTT (5 mM) e elevada
 concentração de guanidina (6 M). A fluorescência intrínseca revela que a estrutura
 terciária sofre influência do pH, guanidina (1 M) associado à temperatura e na
 presença de MnCl2 e DTT, enquanto a fluorescência extrínseca, utilizando a sonda
 ANS, revela mudanças em extremos de pH e na presença de MnCl2 e DTT. Os
 resultados da fluorescência sugerem que tanto o aumento da atividade enzimática
 na presença dos cofatores quanto a perda da atividade em valores extremos de pH
 relacionam-se às alterações da estrutura terciária da enzima. Dessa forma, a
 xilanase de T. lanuginosus possui características bioquímicas interessantes para
 aplicação em diversos setores industriais que utilizam principalmente condições de temperatura elevada.",
 	publisher = {Universidade Estadual do Oeste do Paraná},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas},
 	note = {Centro de Ciências Médicas e Farmacêuticas}
}