@MASTERSTHESIS{ 2020:209696351,
 	title = {β-frutofuranosidase de Cunninghamella echinulata PA3S12MM: purificação, caracterização bioquímica e aplicação na produção de açúcar invertido},
 	year = {2020},
 	url = "http://tede.unioeste.br/handle/tede/5049",
 	abstract = "Nos mais diversos setores industriais, o uso de enzimas tem sido cada vez mais
 requerido, substituindo diversos processos químicos convencionais. Embora sejam
 cada vez mais empregadas, o elevado custo de enzimas comerciais muitas vezes
 acaba encarecendo etapas essenciais, tornando necessária a busca por novas fontes
 enzimáticas. Neste contexto, os fungos se destacam como microrganismos
 promissores, uma vez que são grandes produtores de diversas enzimas de alto valor
 agregado. Dentre as enzimas produzidas por estes organismos, encontra-se a
 β-frutofuranosidase (β-FFase), que catalisa a hidrólise da ligação glicosídica α1↔2β
 da sacarose. Esta enzima apresenta aplicações em diversos setores industriais, como
 na produção de açúcar invertido, mistura equimolar de glicose e frutose. Obtido a partir
 de um processo conhecido como inversão, o açúcar invertido possui propriedades
 adoçantes superiores à da sacarose, assim como melhor solubilidade e maior
 resistência a cristalização e ao crescimento de microrganismos, sendo utilizado na
 fabricação de bolos, pães, sorvetes, geleias e bombons de recheio pastoso. A
 produção de açúcar invertido através da enzima β-FFase, embora origine um produto
 de elevada qualidade, apresenta custos consideráveis, sendo de fundamental
 importância a busca por novas fontes e metodologias que viabilizem a catálise
 enzimática. Deste modo, os objetivos deste trabalho consistiram no screening
 enzimático, otimização, purificação, caracterização e aplicação da β-FFase de
 Cunninghamella echinulata PA3S12MM na produção de açúcar invertido. A partir dos
 ensaios de screening enzimático, verificou-se que o fungo C. echinulata produz as
 enzimas poligalacturonase (20,8 e 16,06 U mL-1 ) e β-FFase (133,65 e 194,31 U mL-1
 ) nos extratos extra e intracelular, respectivamente. A maior produção de β-FFase foi
 verificada em meio Vogel e as condições de cultivo foram otimizadas através do
 delineamento composto central rotacional, onde a máxima produção desta enzima foi
 alcançada quando o fungo foi cultivado por 8 dias à 28 °C e suplementado com 1%
 de casca de maçã, alcançando 1054,85 U mL-1 . As melhores condições para pH e
 temperatura da enzima presente no extrato bruto foram pH 5,0 e 60 °C. A β-FFase foi
 purificada através de colunas de troca iônica e exclusão molecular e apresentou
 massa molecular relativa de 89,2 kDa, atividade máxima em pH 6,0 e temperatura de
 60 °C, além de apresentar estabilidade em pHs alcalinos e termoativação à 50 °C. Foi
 verificado que a enzima é multifuncional, uma vez que hidrolisou diferentes substratos,
 e sua atividade aumentou na presença de Mn2+ e DTT. Os valores aparentes de Km,
 Vmáx e Kcat para hidrólise da sacarose foram 173,8 mmol L-1 , 908,7 mmol L-1 min-1 e
 1388,79 s-1 , respectivamente. O conteúdo de carboidratos da enzima purificada foi de
 83,13% e a análise dos produtos de hidrólise e transfrutosilação indicaram que a
 enzima foi eficaz na produção de glicose e frutose, mas não apresentou atividade
 frutosiltransferase. A enzima imobilizada em alginato de cálcio exibiu bons resultados
 na conversão da sacarose, mostrando-se promissora para aplicações industriais. Os
 resultados sugerem que C. echinulata PA3S12MM é um excelente produtor de
 β-FFase, com elevada atividade catalítica, estabilidade em pHs alcalinos, caráter
 multifuncional, além de exibir bons resultados na inversão da sacarose.",
 	publisher = {Universidade Estadual do Oeste do Paraná},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas},
 	note = {Centro de Ciências Médicas e Farmacêuticas}
}